1.一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,该稳定化细胞穿膜肽包含穿膜肽基肽和疏水性侧链,穿膜肽基肽为富含精氨酸的细胞穿透肽;所述疏水性侧链包含疏水性小分子,所述稳定化细胞穿膜肽为通过在所述穿膜肽基肽的序列中引入两个天然的半胱氨酸,利用半胱氨酸的烷基化/芳基化反应与所述疏水性小分子交联获得的具有环化侧链的环肽。
2.如权利要求1所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述疏水性小分子选自全氟苯、1,3-二(溴甲基)苯、十氟联苯和4,4'-双(溴甲基)联苯中的任意一种。
3.如权利要求1所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述穿膜肽基肽选自R8衍生物或Tat衍生物,其中,R8衍生物的结构如式1所示:
Tat衍生物的结构如式2所示:
其中,R为可接枝的生物荧光小分子或药物小分子。
4.如权利要求1所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述稳定化细胞穿膜肽为同手性序列环肽。
5.如权利要求4所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述稳定化细胞穿膜肽为左旋序列环肽。
6.如权利要求3所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述环化侧链的环化位置为穿膜肽基肽的i+4或i+7位置,其中,i是多肽链中任意氨基酸残基位置。
7.如权利要求1所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽,其特征在于,所述稳定化细胞穿膜肽的结构如式3或式4所示:其中,R为可接枝的生物荧光小分子或药物小分子。
8.如权利要求1-7中任一项所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:S1:线性多肽环化:将树脂用有机溶剂溶胀后,除去有机溶剂,然后向反应管中加入混合溶液选择性地除去Cys或Trt保护基,直至溶液中的黄色消失后用有机溶剂轮流清洗多次,再将适量的疏水性小分子与N,N-二异丙基乙胺溶解在DMF中,混合均匀后加入反应管中反应4小时,其中,混合溶液由以下体积比的组分组成:3%三氟乙酸、5%三异丙基硅烷和
92%二氯甲烷;
S2:FITC标记:多肽环化后在脱保护液中除去保护基团,洗涤,再将适量的FITC和N,N-二异丙基乙胺完全溶解于N,N-二甲基甲酰胺中,将FITC溶液与多肽置于EP管中在摇床上摇晃过夜反应,将反应过后的树脂用溶剂轮流清洗多次,直至未反应的FITC完全除去,用甲醇收缩树脂,氮气吹干;
S3:从树脂上切下多肽:在室温下,使用合适的混合溶液与树脂一起摇晃4小时,将多肽从树脂上切下,用氮气流吹去部分溶液,加入冷乙醚超声处理,离心沉淀,然后弃去乙醚并重复多次,底部沉淀在室温下自然干燥得到粗肽;
S4:多肽纯化:将粗肽溶解在溶剂中,并利用液相色谱纯化粗肽,通过LC-MS确定目标多肽的位置后收集目标产物,收集到的纯肽冷冻干燥之后冷冻保存。
9.如权利要求1-7中任一项所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽在制备药物载体方面的应用。
10.如权利要求1-7中任一项所述的一种具有疏水性侧链的稳定化细胞穿膜肽在肿瘤治疗方面的应用。