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专利号: 2020111549944
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

(1)蛋白酶催化合成甘氨酸寡肽;

(2)脂肪酶催化甘氨酸寡肽接枝聚乙二醇制备得到甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物。

2.根据权利要求1所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述蛋白酶催化合成甘氨酸寡肽的方法包括:在磷酸缓冲液中加入L-甘氨酸甲酯盐酸盐、二甲亚砜和蛋白酶,在30~70℃下反应5~10小时;反应结束后,,离心取沉淀,洗涤,冷冻干燥后得到甘氨酸寡肽。

3.根据权利要求2所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的任一种,所述蛋白酶的添加量为1~10U/g L-甘氨酸甲酯盐酸盐。

4.根据权利要求2或3所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述磷酸缓冲液为0.1~0.2M的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,磷酸缓冲液的pH值为5.5~8.0,所述二甲亚砜的体积为2.5~25%的磷酸缓冲液。

5.根据权利要求1~4任一所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述脂肪酶催化甘氨酸寡肽接枝聚乙二醇制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法包括如下步骤:在无水三氯乙烷中加入步骤(1)制备得到的甘氨酸寡肽、聚乙二醇单甲醚和脂肪酶,于绝对压力0~101.325KPa和30~50℃下反应10~24h;反应结束后,将反应混合物在-4~0℃静置8~20h,减压抽滤,将滤液干燥,再加入预热后的丙酮搅拌直至全部溶解,将所得溶液在-4~0℃静置8~20h,减压抽滤,所得沉淀即为甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物。

6.根据权利要求5所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述甘氨酸寡肽和聚乙二醇单甲醚与无水三氯乙烷的质量g体积mL为1:1.2~3,其中,甘丙氨酸寡肽、聚乙二醇单甲醚的重量比为1:1.2~1:5。

7.根据权利要求5或6所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述聚乙二醇单甲醚的平均分子量为200、400或1000Da。

8.根据权利要求5~7任一所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述脂肪酶的添加量为1~10U/g底物,所述底物为甘氨酸寡肽和聚乙二醇单甲醚。

9.根据权利要求1~8任一所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法,其特征在于,所述脂肪酶为爪哇毛霉菌脂肪酶M、黑曲霉脂肪酶A、米曲霉脂肪酶、疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶中的任一种。

10.权利要求1~9任一所述的一种脂肪酶催化制备甘氨酸寡肽-聚乙二醇共聚物的方法在生物、医药和天然高分子材料领域的应用。