1.一种检测蔗糖酶和葡萄糖氧化酶的电化学阻抗传感器,具体步骤如下:(1)传感器的制备
a.GSH‑Ag(I)复合物的制备:依次取1~10μL浓度为0.1~20mM的硝酸银水溶液、1~10μL浓度为0.1~20mM谷胱甘肽水溶液,混合均匀后加入磷酸缓冲溶液配成50~120μL的溶液,将该溶液在25~40℃下缓缓震荡8~17min,即得到GSH‑Ag(I)复合物;使用前将该复合物溶液与50~120μL 0.02%wt Nafion溶液混合均匀,静置5~20min;
b.将玻碳电极在麂皮上依次用粒径0.3μm、0.05μm的三氧化二铝粉末抛光0.5~5min,抛光后将电极置于超声清洗器中用超纯水超声清洗1~5min,然后用N2吹干,记为GCE;
c.利用循环伏安法,设置电位范围为‑1.2~0.5V、扫速5~20mV/s将0.5~2mg/mL石墨烯分散液GO电沉积到裸玻碳电极上得到GO/GCE;然后取5~15μL步骤(a)得到的溶液滴涂于GO/GCE上,室温下静置20~60min,用超纯水缓缓冲洗电极,记为GSH‑Ag(I)/GO/GCE;
(2)电催化性能测试
将GSH‑Ag(I)/GO/GCE置于含2mM 3,3‑二氨基联苯胺DAB、2mM H2O2的磷酸缓冲溶液中通
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过循环伏安法扫描10个循环周期,再将电极转移至5mM[Fe(CN)6] 溶液中检测电化学交流阻抗响应;
(3)蔗糖酶及葡萄糖氧化酶的分析检测
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100μL反应液中含有1~50mM蔗糖、0.1~10U/L蔗糖酶、0.01~10 U/L葡萄糖氧化酶及磷酸缓冲溶液,将该反应液置于25~40℃水浴中反应40~120min;反应完成后,加入100μL含2mM DAB的磷酸缓冲溶液,再将GSH‑Ag(I)/GO/GCE置于这种混合溶液中通过循环伏安法
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扫描10个循环周期,再将电极转移至5mM[Fe(CN)6] 溶液中检测电化学交流阻抗响应;
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在0.1~10U/L浓度范围内改变蔗糖酶浓度,其它步骤同上,可实现不同浓度的蔗糖酶检测;
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在0.01~10U/L浓度范围内改变葡萄糖氧化酶浓度,其它步骤同上,可实现不同浓度葡萄糖氧化酶检测。
2.根据权利要求1所述的传感器,其特征在于:在H2O2存在时,利用循环伏安法将3,3‑二氨基联苯胺DAB氧化形成不导电的不溶性IP并附着在电极表面,再通过交流阻抗法得到电阻变化规律。
3.根据权利要求2所述的传感器,其特征在于,循环伏安法电位范围:‑1.0~+0.5V,扫‑1 ‑2 5速:10mV·s ;交流阻抗法频率范围:10 ~10Hz,振幅:2mV。
4.根据权利要求1‑3任一项所述的传感器,其特征在于:用于不同浓度蔗糖酶和葡萄糖2
氧化酶的检测,对蔗糖酶浓度线性相关方程为y=8702C蔗糖酶+10806,R=0.9998,检测限为2
0.05U/L;对葡萄糖氧化酶浓度线性相关方程为y=8880C葡萄糖氧化酶+14750,R =0.9954,检测限为0.008U/L。
5.根据权利要求1~3任一项所述的传感器,其特征在于:采用蔗糖酶、葡萄糖氧化酶及GSH‑Ag(I)复合物作为三个信号输出,3,3‑二氨基联苯胺DAB和H2O2条件下的阻抗信号作为信号输出,构建了一种AND‑AND‑AND布尔逻辑门。