欢迎来到知嘟嘟! 联系电话:13336804447 卖家免费入驻,海量在线求购! 卖家免费入驻,海量在线求购!
知嘟嘟
我要发布
联系电话:13336804447
知嘟嘟经纪人
收藏
专利号: 2020106509345
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
价格&联系人
年费信息
委托购买

摘要:

权利要求书:

1.一株分泌抗氟虫腈及其代谢物单克隆抗体的杂交瘤细胞株ABC10,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2019年11月28日,保藏编号CGMCC No.19168。

2.抗氟虫腈及其代谢物单克隆抗体,其特征在于:它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No. 19168的杂交瘤细胞株ABC10分泌产生。

3.氟虫腈半抗原的制备方法,其特征在于:

(1)将200 mg 氟虫腈溶于1mL 丙酮中,置于圆底烧瓶中,搅拌下逐滴加入20 mL 0.5 mol/L NaOH溶液,60℃水浴反应24 h;反应液由浑浊逐渐变为浅黄色澄清溶液,冷却至室温,冰浴下,用1.0 mol/L盐酸将反应液pH调为4.8-5.2;有浅黄色固体析出,减压抽滤,纯水洗涤若干次,干燥;得到的产物为FPN-COOH,4℃贮存,备用;

和(2)将200 mg 氟虫腈与141.4 mg 6-(叔丁氧基)-6-氧代己酸溶于6 mL二氯甲烷中,搅拌下依次加入134.2 mg 1-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC 与80.6mg 1- N-羟基丁二酰亚胺NHS,室温反应3d;冰浴下,缓慢滴加1.0mL三氟乙酸TFA,室温反应1h;用纯水洗涤3次,收集有机相,减压蒸干,得到产物FPN-HA。

4.氟虫腈完全抗原的制备方法,其特征在于步骤如下:

(1)氟虫腈-BSA的制备:称取3.2 mg 已制备的FPN-COOH,溶于200μL DMF中,搅拌下依次加入1.6 mg 1-乙基碳二亚胺盐酸盐和1.0 mg N-羟基琥珀酰亚胺,室温反应0.5 h,得到的混合物称为A液;然后分别称取6.0 mg 牛血清白蛋白BSA溶于2 mL 硼酸缓冲溶液,称为B液;将A液缓慢加入到B液中,搅拌下室温反应4 h;用0.01 mol/L PBS透析3 d,分离完全抗原和未偶联的小分子,收集上清,即得偶联物氟虫腈-BSA,-20℃冻存,备用;

(2)包被原氟虫腈-OVA的制备:称取6.0 mg FPN-HA,2.5 mg EDC,1.5 mg NHS,用300 μL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解,室温搅拌反应6h,称为C液;称取10 mg 鸡卵白蛋白OVA,溶解于2 mL硼酸缓冲溶液中,称为D液;在室温条件下,将C液逐滴加入到D液中,室温搅拌反应过夜,即得偶联物氟虫腈-OVA混合液,通过透析分离完全抗原和未偶联的半抗原。

5.权利要求2所述抗氟虫腈及其代谢物单克隆抗体的应用,其特征在于:用于食品安全检测中氟虫腈及其代谢物残留总量的分析检测。