1.一种检测葡萄糖氧化酶及脲酶的电化学生物传感方法，其特征在于，包括如下步骤：Electrode 1：

将金电极用粒径为0.05～1μm的Al2O3粉打磨5～30min，将其置于超纯水中超声清洗1～

3次，每次2～10min；随后将金电极置于0.2～1M硫酸溶液中进行循环伏安测试，扫描范围为‑0.3～1.6V，扫速为0.01～0.1V/s，直至稳定的循环伏安曲线获得，记为Electrode 1；

Electrode 2：

将5～10μL浓度为0.05～5μM的巯基DNA溶液滴加至Electrode 1表面，然后将其置于4℃冰箱中放置过夜；再用0.5～1.5mM巯基乙醇MCH处理20～60min，超纯水缓缓冲洗电极，记为Electrode 2；

其中，巯基DNA探针序列为(5’‑3’)：SH‑TTCAGG；

Electrode 3：

配制总体积为5～10μL的TdT反应液，其中含有1～4μL超纯水，1～2μL 5×TdT缓冲液，1～2μL浓度为5～15mM的dCTP和1～2μL浓度为0.001～15U/mL的TdT，均匀混合后滴于Electrode 2表面，在35～45℃下放置0.5～2h，超纯水缓缓冲洗电极，记为Electrode 3，之

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后利用电化学阻抗法于5.0mM[Fe(CN)6] 中测试其阻抗值；

①葡萄糖氧化酶的检测

制备葡萄糖氧化酶反应液：配制总体积为5～10μL的葡萄糖氧化酶反应液，将2～5μL浓度为1～10mM的葡萄糖，2～5μL浓度为0.01～50U/L的葡萄糖氧化酶，1～5μL浓度为10mM pH＝7.0磷酸缓冲溶液混合，并在37℃下反应30～60min，得到的反应液备用；

将5～10μL葡萄糖氧化酶反应液滴至Electrode 3表面，孵育10～60min，再将电极马上

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置于5.0mM[Fe(CN)6] 中进行电化学阻抗测试；

②脲酶的检测

制备脲酶反应液：配制总体积为5～10μL的脲酶反应液，将2～5μL浓度为0.01～0.1mM的尿素，2～5μL浓度为0.01～100U/L的脲酶，1～5μL浓度为10mMpH＝7.0磷酸缓冲溶液混合，并在37℃下搅拌反应30～60min，得到的反应液备用；

将5～10μL脲酶反应液滴加至上述步骤①中葡萄糖氧化酶反应液处理后的电极表面，

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孵育10～60min，再将电极马上置于5.0mM[Fe(CN)6] 中进行电化学阻抗测试。

2.根据权利要求1所述的电化学生物传感方法，其特征在于，通过电化学阻抗法在5mM

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[Fe(CN)6] 中进行电化学检测。

3.根据权利要求2所述的电化学生物传感方法，其特征在于，所述电化学阻抗法交流频‑2 5率范围为10 ～10Hz，设置初始电压为0.245V，振幅为5mV。

4.根据权利要求1‑3任意一项所述的电化学生物传感方法，其特征在于，所述方法对葡2

萄糖氧化酶浓度线性范围为0.01～20U/L，线性相关方程为Rct＝‑1424lgCGOx+6127，R ＝

0.9987，检测限为0.0061U/L；对脲酶浓度线性范围为0.01～50U/L，线性相关方程为Rct＝2

1314lgCurease+6898，R＝0.9988，检测限为0.0028U/L。