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专利号: 2020103608423
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种多基因组合表达制备蛹虫草多糖的方法,其特征在于所述方法是将组合基因导入蛹虫草细胞构建重组蛹虫草基因工程菌,再将重组蛹虫草基因工程菌接种至发酵培养基中,在22 25 ℃,100‑150 rpm条件下发酵培养,获得含蛹虫草多糖的发酵液,将发酵液分离~纯化,获得蛹虫草多糖;所述组合基因是指磷酸葡萄糖变位酶基因pgm与UDP‑葡萄糖‑6‑脱氢酶基因ugdh的组合;所述磷酸葡萄糖变位酶基因pgm核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述UDP‑葡萄糖‑6‑脱氢酶基因ugdh核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述发酵培养基质量组成:2%葡萄糖,0.70% (NH4)2SO4,0.05% K2HPO4·3H2O,0.05% KH2PO4,0.05% MgSO4·7H2O,0.10% L‑甘氨酸,溶剂为蒸馏水,pH自然。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述发酵液分离纯化方法为:向发酵液中加入四倍体积的无水乙醇,并在4 ℃保存过夜,离心得到沉淀即为蛹虫草多糖,然后将沉淀重悬于1 M NaOH水溶液中,60 ℃水浴1 h,离心,收集上清,即为蛹虫草多糖溶液。