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专利号: 2020101321147
申请人: 浙江农林大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种脂肪酶催化在线合成香豆素‑3‑羧酸‑6'‑O‑D‑甘露糖酯的方法,其特征在于,所述方法为:将脂肪酶Lipozyme RM IM均匀填充在微流控通道反应器的反应通道中,将香豆素‑3‑羧酸甲酯、D‑甘露糖各自用反应溶剂溶解后,分别通过第一注射器、第二注射器注入管道汇总后,进入反应通道内进行反应,控制反应温度为30~60℃,混合液在反应通道内的连续流动反应时间为10~60min,流出反应通道的反应液通过产物收集器在线收集,经后处理,得到产物香豆素‑3‑羧酸‑6'‑O‑D‑甘露糖酯(I);

所述反应溶剂为二甲基亚砜和叔戊醇的混合溶剂,其中二甲基亚砜与叔戊醇的体积比为1:8~20;

进入反应通道内的混合液中,香豆素‑3‑羧酸甲酯、D‑甘露糖的物质的量之比为1:0.2~3;

所述后处理的方法为:通过产物收集器在线收集反应液,减压蒸馏除去溶剂,用200‑

300目硅胶湿法装柱,洗脱试剂为二氯甲烷:甲醇=10:1.5,柱高35cm,柱直径4.5cm,样品用‑1洗脱试剂溶解后湿法上柱,洗脱液收集流速2mL·min ,同时TLC跟踪洗脱进程,将得到的含有单一产物的洗脱液合并蒸干,得到白色固体,获得香豆素‑3‑羧酸‑6'‑O‑D‑甘露糖酯;

2.如权利要求1所述脂肪酶催化在线合成香豆素‑3‑羧酸‑6'‑O‑D‑甘露糖酯的方法,其特征在于,所述香豆素‑3‑羧酸甲酯、D‑甘露糖各自用反应溶剂溶解后,所得香豆素‑3‑羧酸甲酯溶液、D‑甘露糖溶液的物质的量浓度之比为1:0.2~3;所述香豆素‑3‑羧酸甲酯溶液、D‑甘露糖溶液分别通过第一注射器、第二注射器注射时,流速相同。

3.如权利要求1所述脂肪酶催化在线合成香豆素‑3‑羧酸‑6'‑O‑D‑甘露糖酯的方法,其特征在于,催化剂脂肪酶Lipozyme RM IM的加入量以反应介质的体积计为0.025~0.05g/mL。