1.一种基于DNA纳米网的美杜莎式p300电化学发光传感器的制备方法，具体步骤如下：(1)捕获单元P‑Au‑Fe3O4的制备

a.Fe3O4NPs：将2～10g FeCl3·6H2O和5～50g乙酸钠在搅拌下溶解在20～200mL乙二醇中，然后将所得溶液转移到聚四氟乙烯衬里的不锈钢高压釜中并密封以在180～250℃下加热，反应4～12h后，将高压釜冷却至室温，将得到的黑色磁铁矿用乙醇彻底洗涤，并在45～

80℃下真空干燥；

b.L‑半胱氨酸官能化Fe3O4NPs：在超声下用2～12mL浓度为0.1～2M的HCl水溶液预处理

5～30mg Fe3O4NPs 3～18min，然后用永久磁铁回收磁性NPs，用蒸馏水彻底洗涤数次，再分散于5～15mL浓度为2～20g/L的L‑半胱氨酸水溶液的混合物中，超声处理0.5～2h，随后，通过永磁体分离产物并用蒸馏水洗涤，并再分散于8～30mL蒸馏水中；

c.Au‑Fe3O4NPs：将1～4mL浓度为10～40mM的氯金酸滴加到得到的L‑半胱氨酸官能化的Fe3O4NPs悬浮液中，将混合物溶液搅拌1～5h，然后加入1～10mL浓度为0.5～1.5wt％的L‑抗坏血酸混合，并将混合溶液再搅拌1～5h，最后，通过使用永磁体，将产物分离并用蒸馏水和乙醇洗涤数次，然后再分散在蒸馏水中；

d.P‑Au‑Fe3O4：加入2.5～7.5μL浓度为50～500μM的底物肽溶液，并在4℃下保持过夜，然后用磷酸盐缓冲液洗涤；

2+

(2)信号单元Ru(phen)3 ‑NetDNA@Ab的制备

a.NetDNA@Ab的合成

①DNA单链退火：将单链DNA溶液升温到85～98℃，2～15min，逐渐冷却到18～25℃，并于18～25℃保持0.5～1.5h，以得到二级结构；

所述单链DNA溶液中，DNA序列选自如下之一：

1‑net：

TGT TGA TAG TCT AGA ACA TGA AAA GAT TG GG ATA TAG TAT AAG GAT；

2‑net：

TGT TGA TAG TCT AGA ATC CTT ATA CTA TAT CC CAC CTG ACT CCT GAG GAG AAG；

3‑net：

TGT TGA TAG TCT AGA CTT CTC C AC CCC CCC AGG AGT CAG GTG CA ATC TTT TCA TGT；

4‑net：H2N‑ATC GCA TCT AGA CTA TCA ACA ACT AGA TAC ATA CAG；

5‑net：H2N‑ATC GCA TCT AGA CTA TCA ACA CTG TAT GTA TCT AGT；

②取0.2～1.5μL浓度为10～30Mm的有‑NH2结构的4‑net或5‑net，加入0.2～1.8μL的浓‑3 ‑1度为10 ～10 mg/mL乙酰基抗体Ab溶液，同时加入EDC/NHS偶联试剂，室温下震摇0.5～3h，处理好的4‑net和5‑net混合均匀，在88～98℃下水浴反应2～20min，然后2～6℃下迅速降温，使之形成双链结构；其中所述EDC/NHS偶联试剂总用量为0.3～2μL，浓度分别为30～300μM/3～30μM，pH＝6.0；

③将0.2～1.2μL的浓度为5～35μM的1‑net、0.2～1.2μL的浓度为5～35μM的2‑net、0.2～1.2μL的浓度为5～35μM的3‑net、1～7μL TM缓冲液、0.5～2μL的浓度为10～40mM的TCEP加入到②溶液中，总体积为10μL，在85～97℃下，反应3～10min，在PCR中逐渐冷却至18～28℃，并在该温度下孵育1～3h，以得到二级结构；

④制备TdT反应液：0.5～3μL蒸馏水、1～6μL TdT缓冲液、2～6μL的浓度为2～50mM的dTTP、2～6μL的浓度为1～50U/mL的TdT，总体积为20μL，将TdT反应液混合均匀加入③溶液中，29～40℃水浴0.5～2h；

2+

b.Ru(phen)3 ‑NetDNA@Ab合成

再取1～15μL的浓度为5～100mM Ru(phen)3Cl2·H2O的PBS溶液，与NetDNA@Ab溶液混合均匀，总体积25μL，4℃冰箱储存备用；其中所述PBS溶液浓度为0.1M，pH＝7.4；

(3)传感器的制备

磁性玻碳电极MGCE：为获得镜面状表面，用1.0、0.3和0.05μm氧化铝粉末仔细轻柔地抛光MGCE，并分别用水和乙醇超声冲洗1～6min，然后在室温下用N2干燥MGCE；

PAc‑Au‑Fe3O4/MGCE：体积为2.5～7.5μL的捕获单元在MGCE表面覆盖0.5～5min，得到P‑Au‑Fe3O4/MGCE，然后用磷酸盐缓冲液冲洗表面；之后，将电极浸入0.1～2mM巯基己醇溶液中

10～50min，然后用磷酸盐缓冲液冲洗表面；之后将HAT p300反应液，滴到电极表面并在28～38℃下孵育60～120min，用磷酸盐缓冲液洗涤电极缓缓除去过量的试剂，标记为PAc‑Au‑Fe3O4/MGCE；其中所述HAT p300反应液总体积为200μL，涉及不同浓度的HAT p300，含有100～1000μM Ac‑CoA和缓冲液；

2+ 2+

Ru(phen)3 ‑NetDNA@Ab/PAc‑Au‑Fe3O4/MGCE：取信号单元Ru(phen)3 ‑NetDNA@Ab 2.5～

7.5μL滴涂于PAc‑Au‑Fe3O4/MGCE，27～40℃静置10～50min，传感器不使用时，储存于4℃冰箱中；

所述TM缓冲液配制：20mM三羟甲基氨基甲烷Tris，50mM氯化镁MgCl2，pH 8.0。

2.一种基于DNA纳米网的美杜莎式p300电化学发光传感器，其通过权利要求1所述方法制备获得。

3.根据权利要求2所述的基于DNA纳米网的美杜莎式p300电化学发光传感器的应用，其特征在于：应用于检测低浓度的乙酰转移酶HAT p300，检测限低至1pM。

4.根据权利要求2所述的基于DNA纳米网的美杜莎式p300电化学发光传感器的应用，其特征在于：应用于乙酰转移酶的抑制剂筛选，其中所述抑制剂为漆树酸和C646。