1.一种白参菌的指纹图谱检测方法,以裂裥菌素对照品为参照,采用高压液相色谱法测定其指纹图谱,其特征在于,所述高压液相色谱测定的色谱条件为:采用MCI GEL SCA04色谱柱规格为4.6×150mm,以甲醇为流动相 A,以5%甲醇‑水为流动相B,梯度洗脱,流速1‑
10ml/min,柱温25 40℃,检测波长185‑400nm;理论塔板数按裂裥菌素峰计算应不低于~
3000,其中梯度洗脱过程为:
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所述的白参菌的指纹图谱检测方法,包括以下步骤:(1)供试品溶液的制备:将白参菌冷冻干燥,粉碎,取5‑20g,精密称定,加入 10%醋酸
50‑100ml浸泡24h,再加50‑70%甲醇超声提取1‑2小时,放冷,再称定重量,加甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
(2)对照品溶液1的制备:取裂裥菌素对照品5 10mg,置50ml量瓶中,加甲醇使溶解,~
并稀释至刻度,摇匀,精密吸取5ml,置25ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得;
(3)对照品溶液2的制备:分别取氨基酸混合对照品5 10mg,置50ml量瓶中,加~
0.05mol/L盐酸使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得;
(4)测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 15μl,注入液相色谱仪,记录~
50min分钟内的色谱图,用指纹图谱软件对图谱进行处理,即得白参菌的指纹图谱。
2.根据权利要求1所述的白参菌的指纹图谱检测方法,其特征在于,所述氨基酸混合对照品选自8种人体必需氨基酸和其他非必需12种氨基酸,8种人体必需氨基酸分别为缬氨酸, 异亮氨酸, 亮氨酸, 苏氨酸, 甲硫氨酸, 赖氨酸, 苯丙氨酸和色氨酸,非必需12种氨基酸分别为半胱氨酸、丝氨酸、甘氨酸、酪氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酸谷氨酰胺、丙氨酸、精氨酸、组氨酸、脯氨酸。
3.根据权利要求1所述的白参菌的指纹图谱检测方法,其特征在于,包括以下步骤 :(1)供试品溶液的制备:将白参菌冷冻干燥,粉碎,取5‑20g,精密称定,加入 10%醋酸
80ml浸泡24h,再加55%甲醇超声提取1小时,放冷,再称定重量,加甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
(2)对照品溶液1的制备:取裂裥菌素对照品6mg,置50ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,精密吸取5ml,置25ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得;
(3)对照品溶液2的制备:分别取氨基酸混合对照品5mg,置50ml量瓶中,加0.05mol/L盐酸使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得;
(4)测定:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,记录50min分钟内的色谱图,用指纹图谱软件对图谱进行处理,即得白参菌的指纹图谱。
4.根据权利要求1所述白参菌的指纹图谱检测方法,其特征在于,以7号为对照峰,17个共有峰相对保留时间及相对峰面积及峰归属如下表:。