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专利号: 2019106960341
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-12-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:(1)向聚乙烯亚胺溶液和磷酸盐缓冲溶液的混合液中,加入一系列不同浓度的对苯二酚溶液,反应之后,在373 nm的激发波长下检测体系的荧光光谱;

(2)以对苯二酚溶液的浓度为横坐标,体系在510 nm波长处的荧光强度为纵坐标构建标准曲线,进而定量检测出对苯二酚的浓度。

2.根据权利要求1所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,聚乙烯亚胺溶液、磷酸盐缓冲溶液的终浓度分别为0.29 g /L  0.37 g /L、18 mM  22 mM;所述磷酸~ ~

盐缓冲溶液的pH为8.0 10.0。

~

3.根据权利要求1所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,对苯二酚溶液的终浓度分别为0、0.05、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1,2.4、2.7、3.0、3.3、3.6、3.9、

4.2、4.5、6.5、9.0、12.0、15.0 μM。

4.根据权利要求1所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,所述反应的条件为55 65℃反应85  95分钟。

~ ~

5.一种β‑葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:A、分别使用不同浓度的β‑葡萄糖苷酶水解β‑熊果苷,得到水解液;

B、向聚乙烯亚胺溶液和磷酸盐缓冲溶液的混合液中,分别加入步骤A得到的水解液,孵育之后,在373 nm的激发波长下检测体系的荧光光谱;

C、以β‑葡萄糖苷酶的浓度为横坐标,体系在510 nm波长处的荧光强度为纵坐标构建标准曲线,进而定量检测出β‑葡萄糖苷酶的活性。

6.根据权利要求5所述的β‑葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,β‑熊果苷、聚乙烯亚胺溶液的终浓度分别为47 μM  53 μM、0.29 g /L  0.37 g /L。

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7.根据权利要求5所述的β‑葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤A具体包括以下步骤:将100 μL、1.0 mM β‑熊果苷溶液与100 μL的pH = 6.5的40 mM磷酸盐缓冲液混合,然后向混合物中加入500 μL不同浓度的β‑葡萄糖苷酶,以使体系中β‑葡萄糖苷酶的终浓度分别为0、1、3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36、39、42、45、50、60、70、80、90、‑1

100U L 。

8.根据权利要求5‑7任意一项所述的β‑葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤B中,所述磷酸盐缓冲溶液的pH为8.0 10.0。

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9.根据权利要求5‑7任意一项所述的β‑葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤B中,孵育的条件为:55 65℃反应85 95分钟。

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