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专利号: 2019103540451
申请人: 江苏大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2025-11-07
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、采用高压灭菌和碱/酸顺序抽提预处理纸浆纤维,再用TEMPO催化氧化结合高压均质处理,制得浓度>3%,内毒素含量低于5EU/g,(1,3)‑beta‑D‑葡聚糖含量低于10μg/g的纳米纤维素水凝胶;

所述预处理,包括以下步骤:

A1、将漂白后的纸浆纤维搅拌分散于无菌水,加入氢氧化钠、过氧化氢,搅拌,高压灭菌后,洗涤至中性;

A2、再搅拌分散于无菌水,加入盐酸,搅拌,高压灭菌后,洗涤至中性;S2、生物偶联灭菌后的木糖葡聚糖和细胞黏附因子,制得生物活性木糖葡聚糖;S3、将0.5‑2.0g生物活性木糖葡聚糖溶于10‑50ml无菌水中,再加入100g纳米纤维素水凝胶、0.02‑1.0g灭菌后的凝胶增强剂,混合均匀后,制得纳米纤维素生物打印凝胶油墨。

2.根据权利要求1所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤A1中纸浆纤维为100g,无菌水为3L,氢氧化钠5‑10g、过氧化氢2‑5g,灭菌时间为

15‑60min;

步骤A2中无菌水为3L,盐酸10‑30g,灭菌时间为15‑60min。

3.据权利要求1所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中的TEMPO催化氧化结合高压均质处理,包括以下步骤:B1、在预处理后的纸浆纤维中,加入TEMPO,溴化钠,次氯酸钠,调节并保持pH至10.0‑

10.5,搅拌反应直至体系pH稳定;

B2、过滤并使用无菌水清洗至滤液电导率低于5μS/cm;

B3、清洗后的纸浆纤维分散在无菌水中,分别以200‑600bar和800‑1800bar的压力通过高压均质,制得纳米纤维素水凝胶。

4.据权利要求3所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤B1中的TEMPO为0.5‑1.0g,溴化钠为2‑6g,次氯酸钠的浓度为15%,质量为300‑600g;

步骤B2中的无菌水为2L。

5.据权利要求1所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中木糖葡聚糖的灭菌为:将木糖葡聚糖溶于无菌水中,高压灭菌;

步骤S3中凝胶增强剂的灭菌为:将凝胶增强剂溶于无菌水中,高压灭菌。

6.据权利要求1所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中的生物偶联,包括以下步骤:C1、将灭菌后的木糖葡聚糖沉淀于乙醇中,过滤清洗,冷冻干燥,制得纯化木糖葡聚糖;

C2、纯化木糖葡聚糖溶于无菌水中,加入细胞黏附因子,室温搅拌反应,经透析袋,无菌水流水透析后,冷冻干燥,制得生物活性木糖葡聚糖。

7.据权利要求6所述的一种纳米纤维素生物打印凝胶油墨的制备方法,其特征在于,所述步骤C1中的乙醇为3L;

步骤C2中的无菌水为1L,细胞黏附因子为1‑3g,反应时间为6‑24h,透析袋为3.5K,透析时间为12‑48h。