1.化合物cytorhizin B或cytorhizin C,其结构式如式(I)中所示:
2.一种权利要求1所述的化合物cytorhizin B和cytorhizin C的制备方法,其特征在于,所述的化合物cytorhizin B和cytorhizin C是从巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物中分离制备得到。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
(1)制备巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物,分离菌丝体和发酵液,发酵液经大孔树脂D101柱,先用水洗掉培养基残渣,再用体积分数95%乙醇水溶液等度洗脱,收集95%乙醇水溶液洗脱的组分,减压浓缩得浸膏;
(2)将步骤(1)得到的浸膏经C18反相柱层析,用甲醇-水作为洗脱剂,从体积比60:40至
100:0梯度洗脱,收集甲醇:水体积比为60:40洗脱下来的馏分Fr.2;Fr.2经硅胶柱层析,以正己烷:乙酸乙酯的体积比为20:1,10:1,5:1,2:1,1:1,0:1进行梯度洗脱,经TLC板合并相同主点得到9个流分,分别为Fr.2-1-Fr.2-9,收集正己烷:乙酸乙酯体积比5:1洗脱的且经TLC以展开剂为正己烷:乙酸乙酯=5:1v/v,rf值为0.3-0.6的组分Fr.2-6;收集正己烷:乙酸乙酯体积比5:1洗脱的且经TLC以展开剂正己烷:乙酸乙酯=5:1v/v,rf值为0.2-0.3的组分Fr.2-7;
将流分Fr.2-6再经硅胶柱层析,以正己烷:乙酸乙酯的体积比为20:1,10:1,5:1,2:1,
1:1,0:1梯度洗脱得到6个组分,分别为Fr.2.6.1-Fr.2.6.6,将正己烷:乙酸乙酯体积比为
2:1洗脱得到的组分Fr.2.6.6经进一步的半制备HPLC纯化,制得化合物cytorhizin B;将流分Fr.2-7再经凝胶柱层析Sephadex LH-20,以二氯甲烷:甲醇体积比1:1作为洗脱剂洗脱,经TLC板合并主点得到10个亚组分,分别为Fr.2-7-1-Fr.2-7-10,收集经TLC以展开剂为正己烷:乙酸乙酯=2:1v/v,rf为0.5-0.8得到的亚组分Fr.2-7-5,将Fr.2-7-5经进一步的硅胶柱层析,以正己烷:乙酸乙酯体积比8:1→1:1梯度洗脱,得到五个亚组分Fr.2-7-5-1-Fr.2-7-5-5,将正己烷:乙酸乙酯体积比5:1洗脱的亚组分Fr.2-7-5-2经进一步的半制备HPLC纯化,制得化合物cytorhizin C。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的将组分Fr.2.6.6经进一步的半制备HPLC纯化,制得化合物cytorhizin B具体为:将组分Fr.2.6.6以流动相为体积比75:25的乙腈/水,流速为3mL/min,过YMC-pack ODS/AQ柱,收集保留时间为17.8min的组分,得到化合物cytorhizin B;
所述的将亚组分Fr.2-7-5-2经进一步的半制备HPLC纯化,制得化合物cytorhizin C具体为:将亚组分Fr.2-7-5-2以流动相为体积比60:40的乙腈/水,流速为3mL/min,过YMC-pack ODS/AQ柱,收集保留时间为15.8min的组分,得到化合物cytorhizin C。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述的步骤(1)制备巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物具体步骤为:挑取Cytospora rhizophorae A761的菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中,在28℃、120r/min条件下培养5天,制得种子液,然后将种子液以体积分数10%的接种量接种于马铃薯葡萄糖液体培养基中,于28℃、
120r/min条件下培养7天,制得Cytospora rhizophorae A761的发酵培养物。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述的马铃薯葡萄糖液体培养基,每升是通过以下方法配制的:用500mL的纯水煮200g的马铃薯,煮沸20min,过滤得马铃薯汁,再加入葡萄糖20g、KH2PO4 3g、MgSO4 1.5g、维生素B1 10mg,用水补足至1000mL,灭菌制得。
7.权利要求1所述的化合物cytorhizin B和/或cytorhizin C在制备抗肿瘤药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的抗肿瘤药物为抗肝癌、乳腺癌或神经癌的药物。
9.一种抗肿瘤药物,其特征在于,包含权利要求1所述的化合物cytorhizin B或cytorhizin C中的至少一种作为活性成分。
10.巴戟天内生真菌Cytospora rhizophorae A761在制备权利要求1所述的
cytorhizin B和/或cytorhizin C中的应用。