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专利号: 2018116477470
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种杀螟硫磷的半抗原,其特征在于,其结构式如式(II)或(I)所示:; 。

2.权利要求1所述的半抗原的制备方法,其特征在于,3-甲基-4-硝基苯酚与O- 甲基硫代磷酰二氯的二氯甲烷溶液、NaOH水溶液和四丁基溴化铵混合,搅拌,反应12~16 h,经过硅胶层析柱纯化,流动相为体积比为石油醚:乙酸乙酯 =1~10:1的混合溶液,纯化后即得式(II)所示化合物;式(II)所示化合物、6-氨基己酸与1,4-二氧六环混合,搅拌,冰浴下与NaOH 溶液混合,使溶液维持pH 10~11,搅拌12~16 h,即得式(I)所示化合物。

3.一种杀螟硫磷的完全抗原,其特征在于,其结构式如式(III)或(IV)所示:; 。

4.根据权利要求3所述的完全抗原,其特征在于,所述载体蛋白为牛乳铁蛋白、牛血清白蛋白、血蓝蛋白或卵清蛋白中的一种。

5.结构式如式(III)所示完全抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S11. 活化半抗原:在搅拌下结构式如式(I)所示半抗原的N,N-二甲基甲酰胺溶液、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺混合,下避光搅拌4~6h,得到A液;

S12. 载体蛋白溶解于碳酸缓冲液,得到B液,载体蛋白浓度为5~10 mg/mL;

S13. 将S11的A液与S12的B液中混合,用NaOH溶液或碳酸缓冲液调节pH至9.5~9.6,避光反应12~16 h,透析纯化后获得结构式如式(III)所示完全抗原;

其中,结构式如式(I)所示半抗原、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为1:1.2~1.5:1.2~1.5。

6.结构式如式(IV)所示完全抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S21. 结构式如式(II)所示半抗原的1,4-二氧六环溶液,称为A液;

S22. 载体蛋白溶解在碳酸缓冲液,载体蛋白浓度为5~10 mg/mL,称为B液;

S23. 将S21的A液与S22的B液混合,用NaOH溶液调节pH至9.5~9.6,避光反应12~16 h,透析纯化后获得结构式如式(IV)所示完全抗原。

7.根据权利要求5或6任一所述的制备方法,其特征在于,所述A液中的结构式如式(I)或(II)所示半抗原与所述B液中的所述载体蛋白的摩尔比为30~40:1。

8.一种杀螟硫磷的抗体,其特征在于,采用权利要求1所述半抗原中的一种或两种,和/或采用权利要求3所述完全抗原中的一种或两种制备得到。

9.权利要求1所述半抗原、权利要求3所述完全抗原、和/或权利要求8所述抗体在检测杀螟硫磷或制备检测杀螟硫磷试剂盒中的应用。

10.一种基于间接竞争酶联免疫法的杀螟硫磷的检测方法,其特征在于,以式(III)所示化合物为免疫原,以式(IV)所示化合物为包被原。