1.一种生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将日本黄姑鱼鱼皮预处理得鱼皮粉,预处理工艺为:(a)将鱼皮清洗后,冷冻干燥,粉碎至粒径为25 50μm,得鱼皮冷冻粉;
~
(b)将步骤(a)得到的鱼皮冷冻粉加入到0.10 0.50mol/L温控型碱性离子液体中,于不~
同温度条件下超声处理,离心、干燥,得去杂蛋白、脱脂后的鱼皮粉;然后将鱼皮粉置入2~
5wt%的乙酸溶液中,按照每g鱼皮粉中加入0.01 0.03mg胃蛋白酶的添加量加入胃蛋白酶,~
于温度3 5℃条件下提取胶原蛋白,离心干燥,得日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白;
~
所述温控型碱性离子液体为双N-(2-二乙氨基)乙基聚乙二醇双咪唑氢氧根盐;
所述不同温度条件下超声处理的工艺为:先在20 25℃温度下,超声功率密度0.2~ ~
2 2
0.35w/cm,超声处理10 20min;然后在10 15℃温度下,超声功率密度0.7 1.5w/cm ,超声处~ ~ ~
2
理5 8min;最后在然后在4 8℃温度下,超声功率密度2 2.5w/cm,超声处理1 3min;
~ ~ ~ ~
(2)利用复合酶对步骤(1)得到的日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白进行酶解,得日本黄姑鱼鱼皮胶原肽,所述复合酶为光响应凝胶因子改性木瓜蛋白酶;
(3)将日本黄姑鱼鱼皮胶原肽通过二肽基肽酶筛选试剂盒筛选,即得生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂。
2.根据权利要求1所述的一种生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述酶解工艺为:在日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白中加入蒸馏水,然后加入光响应凝胶因子改性木瓜蛋白酶,搅拌均匀得混合液,将混合液置于紫外灯下,先打开紫外灯于紫外光照条件下搅拌反应1~2h;再关闭紫外灯,遮光于黑暗条件下,60 85℃条件下搅拌反应~
0.5 1h;反应结束后80~100℃灭活5~25min;再将反应液5000~8000rpm离心5~10min,收~
集上清,冷冻干燥得到日本黄姑鱼鱼皮胶原肽。