1.一种双光子荧光pH探针，其特征在于：所述探针D1具有以下分子结构：

2.一种如权利要求1所述的双光子荧光pH探针D1的制备方法，其特征在于：合成路线如下所示：

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)按常规方法合成中间体2、3、4、5和6；

(2)中间体7的合成：称取5g咔唑、3g氢氧化钾，加入盛有30mL DMSO的干燥单口烧瓶中，量取4mL 1－溴辛烷置于恒压滴液漏斗中，于烧瓶上装上恒压滴液漏斗；将烧瓶置于80～85℃的油浴中，搅拌下滴入1－溴辛烷，反应2.5-3.5h，冷却后加入100～120mL蒸馏水混合；静置后析出淡黄色固体，过滤，干燥；用无水乙醇重结晶，得白色针状晶体，即中间体7备用；

(3)中间体8的合成：量取6mL干燥的DMF置于干燥的单口烧瓶中，将单口烧瓶置于冰水浴中，再将5mL三氯氧磷滴入单口烧瓶；称取9-辛基咔唑4g溶于40ml氯苯，置于恒压滴液漏斗，于烧瓶上装上恒压滴液漏斗；0.5～1h后，将9-辛基咔唑的氯苯溶液缓缓滴入单口烧瓶，在70～75℃的油浴中搅拌反应5～8h；反应完毕后，冷却，用碳酸氢钠调pH至中性，用氯仿萃取，再用无水硫酸钠干燥，减压脱去溶剂，无水乙醇重结晶，得白色晶体，即中间体8备用；

(4)目标化合物D1的合成：称取1mmol步骤(2)获得的中间体8和1.25mmol氢化钠置于干燥单口烧瓶中，称取1mmol中间体5溶于10mL四氢呋喃，置于恒压加料器中，将恒压加料器装在单口烧瓶上，并抽真空用氩气保护；将烧瓶置于冰水浴中，在强烈搅拌和避光的条件下，将中间体5的四氢呋喃溶液逐滴滴加到混合液中，滴加时间40～50min；滴加完毕后，室温搅拌反应24h，反应结束后，真空脱除THF，用二氯甲烷萃提3～4次，每次15mL，然后水洗2～3次每次10mL，加无水硫酸镁干燥；干燥后过滤，真空脱除溶剂，粗品经硅胶柱色谱分离，其中洗脱液：V(正己烷):V(乙酸乙酯)＝12:1，得黄色粉末即为D1。

4.根据权利要求1所述的双光子荧光标记探针D1或如权利要求2-3所述的合成方法得到的探针D1应用于探测细胞内pH水平、细胞异常信息。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的细胞为成纤维细胞。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的双光子荧光标记探针，其应用方法是：

将D1溶于生理盐水、乙醇、DMSO和聚氧乙烯(60)蓖麻油组成的混合溶液(简称MIS溶液)中，采用HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)缓冲溶液调节pH，在培养小鼠成纤维细胞后的培养基中加入1μmol﹒L-1荧光探针，并在30-40℃、含2-10％CO2的细胞培养箱中孵化20-50min，取出细胞并用缓冲溶液PBS冲洗3-4次，并于无色血清游离介质中再孵化10-20min，然后用共聚焦激光扫描显微镜(λex＝800nm,～1.5W)、20倍目镜将射入的激光共聚焦于细胞上，收集600～650nm通道的荧光，由此获得细胞pH水平，实现对细胞是否异常的监测。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述生理盐水、乙醇、DMSO和聚氧乙烯(60)蓖麻油(CrEL)的体积比为20：35：30：15。