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专利号: 2018103665024
申请人: 湖南科技学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体的选择与消毒,在春季或者秋季取香柚块茎在室内发芽,芽长大后定期喷洒杀菌剂,两周后,再次取芽,芽经过35-40℃热处理后放在5%的次氯酸钠溶液处理8-10min,然后在超净台上的解剖镜

8-40倍下进行茎尖剥离,选取顶芽的茎尖或珠心组织作为备用;(2)初代培养,将选取的茎尖或珠心组织再次放入5%的次氯酸钠溶液处理3-5min后,放入初代培养基中快速繁殖长大;(3)次代培养,将长大后的茎尖或珠心组织接种在次代培养基上培养,诱导分化为愈伤组织或者不定芽;(4)基本培养,将愈伤组织或者不定芽接种在基本培养基上培养,发育成完整的试管苗;(5)试管苗的脱毒检测。

2.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的杀菌剂为0.1%多菌灵和0.1%链霉素的混合液。

3.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述茎尖或珠心组织为顶芽的前端0.3-0.5mm的部分。

4.根据权利要求1或3所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述茎尖或珠心组织带有1-2个叶原基。

5.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述初代培养基的组成为:MS培养基+0.1-0.5mg/L的NAA和/或0.1-0.5mg/L的BA,PH为5.6-6.0。

6.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述初代培养的初期的光照强度为1000lx,4周后增加到2000lx,6周后增加到4000lx,培养温度为21-25℃,光照时间为14-18h/d。

7.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述次代培养基的组成为:MS培养基+0.1-0.5mg/L的NAA和/或0.1-0.5mg/L的BA+0.6-1.0mg/L的GA,PH为

5.6-6.0。

8.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述基本培养基的组成为:MS培养基+6-BA 0.2-0.5mg/L+NAA 0.2-0.5mg/L+蔗糖28-32g/L+琼脂6-8g/L,PH 

5.6-7.0。

9.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述初代培养基、次代培养基和所述基本培养基均是经过巴氏杀毒冷却后再使用的。

10.根据权利要求1所述的一种香柚茎尖快繁脱毒的方法,其特征在于,所述试管苗通过PCR病毒检测方法确定是否含有香柚病毒的。