1.一种区分水牛和奶牛奶的miRNA标记物,其特征在于:所述的miRNA标记物为miR-2285t,其序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种如权利要求1所述的miRNA标志物的检测引物,其特征在于:该检测引物为:miR-2285t的上游引物序列为:5′-ggccagaatctggatga-3′;
miR-2285t的下游引物序列为:5′-gtgcagggtccgaggt-3′。
3.权利要求1所述的miRNA标记物或权利要求2所述的检测引物在区分水牛和奶牛奶中的应用。
4.权利要求1所述的miRNA标记物或权利要求2所述的检测引物在制备区分水牛和奶牛奶检测试剂盒中的应用。
5.一种用于区分水牛和奶牛奶的检测试剂盒,其特征在于包括权利要求2所述的检测引物和/或探针。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于:所述的检测试剂盒包括针对权利要求1所述miR-2285t的反转录试剂、反转录引物、特异性引物、内参引物、荧光定量PCR反应液。
7.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其特征在于:所述的针对所述miR-2285t的反转录引物序列为SEQ ID NO:2。
8.根据权利要求6所述的检测试剂盒,其特征在于:所述的内参引物包括GAPDH内参基因的上游引物和下游引物,上游引物序列为SEQ ID NO:5,下游引物序列为SEQ ID NO:6。
9.权利要求5~8任一项所述的检测试剂盒在区分水牛和奶牛奶中的应用。
10.一种用于区分水牛和奶牛奶的检测方法,其特征在于包括如下步骤:
1)提取水牛和奶牛奶样品外泌体中总RNA;
2)通过反转录引物在反转录酶的作用下进行miR-2285t反转录成cDNA;
3)在荧光实时定量PCR仪上将步骤(2)获得的cDNA和内参基因进行扩增检测;
4)通过溶解曲线分析,2-ΔΔCt法进行相对定量。