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专利号: 2018101495601
申请人: 韶关学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 农业;林业;畜牧业;狩猎;诱捕;捕鱼
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种高含量花青素芥菜品系的选育方法,其特征在于,包括以下步骤:

1)具有一种花青素来源的芥菜品系的选育:紫色小白菜09N‑742作母本,芥菜作父本杂交得到F1代,筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本,芥菜为轮回亲本,连续回交后,筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交,然后利用基因标记一从自交后代中筛选得到纯合体09N‑742‑B;

紫叶油菜p1029作母本,芥菜作父本杂交得到F1代,筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本,芥菜为轮回亲本,连续回交后,筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交,然后利用基因标记二从自交后代中筛选得到纯合体p1029‑B;

紫叶芥菜1280‑1作母本,芥菜作父本杂交得到F1代,筛选F1代中表现型为紫色叶片的单株作母本,芥菜为轮回亲本,连续回交后,筛选回交后代中表现型为紫色叶片的单株进行自交,然后利用基因标记三从自交后代中筛选得到纯合体1280‑1‑B;

2)具有两种花青素来源的芥菜品系的选育:纯合体09N‑742‑B与纯合体p1029‑B杂交后自交,然后利用基因标记一和基因标记二,在自交后代中共同筛选得到纯合体09N‑742‑p1029‑B;

纯合体p1029‑B与纯合体1280‑1‑B杂交后自交,然后利用基因标记二和基因标记三,在自交后代中共同筛选得到纯合体1280‑1‑p1029‑B;

3)具有三种花青素来源的芥菜品系的选育:纯合体09N‑742‑p1029‑B和纯合体1280‑1‑p1029‑B杂交后自交,然后利用基因标记一、基因标记二和基因标记三,从自交后代中共同筛选得到纯合体09N‑742‑p1029‑1280‑1‑B;

4)高含量花青素芥菜品系的选育:纯合体09N‑742‑p1029‑1280‑1‑B自交,得到高含量花青素的芥菜新品系;

所述的基因标记一是紫色小白菜09N‑742基因组中调控花青素代谢基因的标记引物BVRCI613和标记引物BVRCI417;所述的基因标记二是紫叶油菜p1029基因组中调控花青素代谢基因的标记引物598‑1;所述的基因标记三是紫叶芥菜1280‑1基因组中调控花青素代谢基因的标记引物PLC871;

所述的标记引物BVRCI613具有序列表中SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列;所述的标记引物BVRCI417具有序列表中SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列;所述的标记引物598‑1具有序列表中SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的核苷酸序列;所述的标记引物PLC871具有序列表中SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法,其特征在于,在步骤1)中,所述连续回交的代数为5代。

3.根据权利要求2所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法,其特征在于,在步骤1)中,所述连续回交在花蕾期进行,人工取出紫色叶片单株的雄蕊后进行人工授粉。

4.根据权利要求3所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法,其特征在于,在步骤1)至

3)中,所述自交的代数为1代。

5.权利要求1所述的高含量花青素芥菜品系的选育方法,其特征在于,步骤4)中高含量花青素芥菜品系的鉴定方法包括以下步骤:

a.取待测芥菜植株叶片,提取DNA做实验组;分别取紫色小白菜09N‑742植株、紫叶油菜p1029植株和紫叶芥菜1280‑1植株的叶片,提取DNA做对照组;

b.待测芥菜植株的DNA依次与标记引物BVRCI613、标记引物BVRCI417、标记引物598‑1和标记引物PLC871进行PCR扩增;紫色小白菜09N‑742植株的DNA,依次与标记引物BVRCI613和标记引物BVRCI417进行PCR扩增;紫叶油菜p1029植株的DNA,与标记引物598‑1进行PCR扩增;紫叶芥菜1280‑1植株的DNA,与标记引物PLC871进行PCR扩增;

c.分别对步骤b的PCR扩增产物进行电泳并观察条带,在标记引物BVRCI613的PCR扩增产物电泳结果中,待测芥菜植株的电泳条带与紫色小白菜09N‑742植株的条带相同;在标记引物BVRCI417的PCR扩增产物电泳结果中,待测芥菜植株的电泳条带与紫色小白菜09N‑742植株的条带相同;在标记引物598‑1的PCR扩增产物电泳结果中,待测芥菜植株的电泳条带与紫叶油菜p1029植株的条带相同;在标记引物PLC871的PCR扩增产物电泳结果中,待测芥菜植株的电泳条带与紫叶芥菜1280‑1植株的条带相同;

d.同时符合步骤c中全部电泳结果的待测芥菜为所述高含量花青素芥菜品系。