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专利号: 2017113581868
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2025-02-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种基于光控酶级联反应的酸性磷酸酶活性检测方法,其特征在于:

a、二氧化钛纳米材料的制备:0℃下将一定体积的四氯化钛缓慢加入到10mL的去离子水中,搅拌之后得到白色的溶液,然后加热得到乳白色的二氧化钛悬浮液;所得到的悬浮液过滤洗涤,得到的产品烘干得到二氧化钛纳米材料的固体粉末;

b、酸性磷酸酶活性的测定:在微孔板中加入10μL不同浓度的酸性磷酸酶与10μL酸性磷酸酶的底物溶液在pH=6.0的醋酸缓冲溶液中混合摇匀后,37℃下振荡孵育1h;随后加入10μL 0.15mg/mL的TiO2纳米粒子溶液、40μL 0.4g/L的辣根过氧化物酶、100μL pH为4.0的

40mmol/L的醋酸缓冲溶液以及20μL辣根过氧化物酶的特征底物溶液,混合均匀后将微孔板放置于氙灯(λ≥400nm)下照射15min,在酶标仪上测定体系的吸光度。

2.根据权利要求1所述的一种基于光控制酶级联催化反应的酸性磷酸酶活性检测方法,其特征在于所述的步骤a中四氯化钛的体积为1.0-1.5mL。

3.根据权利要求1所述的一种基于光控制酶级联催化反应的酸性磷酸酶活性检测方法,其特征在于所述的酸性磷酸酶的底物选自邻苯二酚磷酸酯、水杨酸磷酸酯。

4.根据权利要求1所述的一种基于光控制酶级联催化反应的酸性磷酸酶活性检测方法,其特征在于所述的辣根过氧化物酶的底物选自3,3’,5,5’-四甲基联苯胺,2,2'-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐。