1.一种基于酶促接枝/磷酸化进行丝素仿生矿化的方法,其特征是先通过漆酶催化氧化丝素蛋白中酪氨酸残基,将壳寡糖接枝到丝素分子上,再借助己糖激酶催化壳寡糖上羟基磷酸化,改善丝素蛋白的仿生矿化效果,具体工艺与步骤如下:(1)丝素蛋白溶液制备:以溴化锂或氯化钙溶解脱胶后的桑蚕丝,制备丝素溶液;
处理工艺处方及条件:将脱胶后的桑蚕丝加入到溴化锂或氯化钙的水溶液中,在60~
80℃溶解后,以去离子水中透析8~36小时后过滤,制得浓度为10~40g/L丝素溶液;
(2)漆酶催化丝素接枝壳寡糖:在步骤(1)处理后的丝素蛋白溶液中加入漆酶和壳寡糖处理;
处理工艺处方及条件:漆酶1~10U/mL,壳寡糖0.5~5g/L,处理温度20~60℃,pH范围
4.0~7.0,处理时间2~24小时;然后以去离子水中透析8~36小时,去除未反应的壳寡糖,制得浓度为20~40g/L的改性丝素溶液;
(3)己糖激酶催化壳寡糖磷酸化:在步骤(2)处理后的改性丝素溶液中加入己糖激酶和三磷酸腺苷处理;
处理工艺处方及条件:己糖激酶1~15U/mL,三磷酸腺苷0.5~10g/L,环磷酸腺苷0~
5g/L,处理温度20~40℃,pH范围6.0~8.0,处理时间2~24小时;然后以去离子水中透析8~24小时,制得浓度为20~40g/L的改性丝素溶液;
(4)改性丝素蛋白膜成型:取步骤(3)反应后的溶液,在-50~-20℃条件下真空冷冻干燥成膜;然后将该丝素膜材料在50~80%乙醇溶液中浸渍0.25~1小时,在30℃烘干;
(5)丝素蛋白膜仿生矿化:将步骤(4)处理后的丝素膜浸渍在1.5倍SBF模拟体液中,在
37℃条件下仿生矿化1~7天,期间每天更换一次模拟体液;仿生矿化结束后以去离子水清洗,在30℃烘干后得到矿化丝素膜。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述漆酶来源于动物、植物或微生物;所述己糖激酶来源于动物、植物或微生物。