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专利号: 2017101828573
申请人: 江西科技师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.球毛壳菌Chaetomium globosum DX-THS3在生产GAMG中的应用,其中,所述球毛壳菌Chaetomium globosum DX-THS3已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2016年1月

4日,保藏号为CCTCC NO:M 2016005。

2.如权利要求1所述的应用,其特征是,包括以下步骤:

1)将球毛壳菌Chaetomium globosum DX-THS3接种到PDA斜面培养基上进行活化培养5

7天,然后用接种环挑取一环菌种接入到已灭菌的种子培养基中,置于温度为28 30℃、转~ ~速为120 160r/min的摇床中,连续培养3 5天,即至菌体的对数生长期;

~ ~

2)按照1 10% w/v的接种量把上述培养好的种子接种至含甘草酸盐或甘草粗提物的~转化培养基中,转化生产GAMG至含量恒定;

3)从发酵液中分离纯化GAMG;

其中,转化培养基的成分及配比为:甘草酸盐或甘草粗提物1.0 5.0g/L,KH2PO4 1.2~ ~

3.2g/L,蛋白胨2.0 5.0g/L,NaCl 0.5 1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.25 0.5g/L,CaCl2 0.011~ ~ ~ ~

0.11g/L,ZnSO4·7H2O 2.87mg/L,MnSO4·H2O 1.69mg/L,H3BO3 0.03mg/L,纯水1000mL,调节pH5.0 6.0,121℃高压蒸汽下灭菌30min;其中甘草酸盐或甘草粗提物是菌体产β-D-葡萄糖~醛酸苷酶的诱导剂。

3.如权利要求2所述的应用,其特征是,在步骤1)中种子培养基的成分及配比为:葡萄糖5.0~20.0g/L,KH2PO4 1.2~3.2g/L,NH4NO3 2.0~5.0g/L,NaCl 0.5~1.0g/L,酵母粉0.05~

0.3g/L,MgSO4·7H2O 0.25~0.5g/L,CaCl2 0.011~0.11g/L,ZnSO4·7H2O 2.87mg/L,MnSO4·H2O 1.69mg/L,H3BO3 0.03mg/L,纯水1000mL,调节pH5.0~6.0,121℃高压蒸汽下灭菌30min。

4.如权利要求2所述的应用,其特征是,在步骤2)中培养条件为:温度28 36℃、转速120~

180r/min;在步骤2)中的甘草酸盐为甘草酸、甘草酸铵盐、甘草酸钠盐或甘草酸钾盐;甘草~粗提物为甘草水提物或甘草醇氨提物。

5.如权利要求2所述的应用,其特征是,在步骤3)中GAMG的分离纯化,包含以下步骤:布氏漏斗抽滤,收集发酵液,用石油醚等体积萃取2次,每次2小时,水相用氯仿等体积萃取两次,每次2小时,水相继续用乙酸乙酯等体积的萃取两次,每次2小时;得到的乙酸乙酯相减压浓缩即为GAMG粗品,然后再用中压柱层析或制备液相方法进一步分离纯化得到GAMG。