1.一种均相电化学传感器的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)、将2.5OD的DNA Aptamer、DNA Trigger、 DNA HP1、DNA HP2序列分别溶解在缓冲溶液中,分别得到DNA Aptamer缓冲溶液、DNA Trigger缓冲溶液、 DNA HP1缓冲溶液和DNA HP2缓冲溶液;
(2)、将DNA Aptamer缓冲溶液和DNA Trigger缓冲溶液混合,培养,制备成DNA Aptamer-Trigger溶液;
(3)、将步骤(2)得到的DNA Aptamer-Trigger溶液和莱克多巴胺溶液混合杂交,莱克多巴胺将DNA Aptamer从DNA Aptamer-Trigger上剥夺下来,从而得到DNA Trigger的溶液;
(4)、将步骤(3)得到DNA Trigger的溶液和DNA HP1、DNA HP2缓冲溶液混合,杂交,制备成DNA HP1- HP2溶液;
(5)、室温下在步骤(4)得到DNA HP1- HP2溶液中,加入抗坏血酸钠,然后,加入硫酸铜培养;制得基于双链DNA为模板制备的铜纳米粒子,作为均相电化学传感器。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)具体为:将步骤(1)制备的DNA Aptamer缓冲溶液、DNA Trigger缓冲溶液稀释至2μM,将20μL 2μM DNA Aptamer缓冲溶液和
16μL 2μM DNA Trigger缓冲溶液混合,在25-45℃下培养20min,制备成DNA Aptamer - Trigger溶液。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)具体的为:将步骤(2)得到的DNA Aptamer-Trigger溶液和不同浓度的莱克多巴胺溶液混合,在25-45℃下杂交20min得到DNA Trigger的溶液。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述莱克多巴胺的浓度分别为0,
0.001, 0.0015, 0.003, 0.006, 0.01, 0.03, 0.1, 1, 1.5, 5, 10, 30, 60, 90, 150,
300 nM。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)具体为:将步骤(3)得到DNA Trigger的溶液和40μL 4μΜ DNA HP1、40μL 4μΜ DNA HP2缓冲溶液混合,在25-45℃下杂交2h,制备成DNA HP1- HP2溶液。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)为:室温下,在步骤(4)得到DNA HP1- HP2溶液中加入抗坏血酸钠,10min后,加入硫酸铜溶液培养5min;得到基于双链DNA为模板制备铜纳米粒。
7.一种均相电化学传感器,采用权利要求1-6任一项所述的方法制备得到。
8.一种采用权利要求1-6任一项所述方法制备的均相电化学传感器的用途,其特征在于,用于检测莱克多巴胺。
9.根据权利要求8所述的均相电化学传感器的用途,其特征在于,检测莱克多巴胺具体方法为:将基于双链DNA为模板制备的铜纳米粒子加入含有双氧水的MOPS缓冲液中,用裸玻碳电极进行循环伏安法检测;根据不同标准浓度的莱克多巴胺制备的铜纳米粒子对应的信号强度,构建信号强度与莱克多巴胺浓度的线性关系,实现对莱克多巴胺检测。
10.根据权利要求8或9所述的均相电化学传感器的用途,其特征在于,检测方法为:裸玻碳电极浸入到3mL含有200μL上述制备铜纳米粒子溶液和终浓度100mM双氧水的MOPS缓冲溶液中,在室温下,进行循环伏安法检测。