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专利号: 2016103874340
申请人: 滨州医学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于同时鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的方法,其特征是,包括以下步骤:(1)制备鉴定芯片:

在具有羧基表面改性的硅片的检测位点上分别装配弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的抗原,然后进行冲洗;再采用封闭试剂封闭所述检测位点,得到鉴定芯片;

(2)实施鉴定:

将待鉴定溶液注入到步骤(1)中鉴定芯片的检测位点内,待鉴定溶液中的抗体分子与所述鉴定芯片上的抗原分子特异性结合,导致芯片的检测位点表面的分子膜层的厚度或密度发生变化;然后进行冲洗;

(3)读取芯片:

采用椭偏显微成像仪检测步骤(2)中的所述变化,由此判定待鉴定溶液中是否含有弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒以及获得它们的抗体含量。

2.如权利要求1所述的方法,其特征是,步骤(1)中,羧基改性表面的硅片的制备方法如下:首先采用去离子水冲洗硅片,然后采用氨基硅烷和浓硫酸的混合液浸泡冲洗后的硅片,再采用无水乙醇冲洗浸泡后的硅片,最后采用饱和琥珀酸钠无水乙醇溶液浸泡冲洗后硅片,获得羧基改性表面的硅片。

3.如权利要求1所述的方法,其特征是:所述氨基硅烷和浓硫酸的体积比为1:(2~~

4),采用氨基硅烷和浓硫酸的混合液的浸泡时间为20~40min,所述饱和琥珀酸钠无水乙醇溶液的浸泡时间为1.5~3h。

4.如权利要求1所述的检测方法,其特征是,步骤(1)中,在装配探针之前,需要将表面羧基改性的硅片置于微流控检测膜片上,采用微流控芯片加样系统进行点加探针,微流控加样流速为1.4~1.6μl/min,用量为10~12μl。

5.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(1)中,采用40~60μl PBS进行冲洗,冲洗速度为8~12μl/min。

6.如权利要求1所述的方法,其特征是:步骤(2)中,待鉴定溶液的注入速度为1.4~1.6μl/min,用量为10~12μl。

7.一种椭偏显微成像蛋白芯片的制备方法,其特征是,包括以下步骤:在具有羧基改性表面的硅片的检测位点上分别点加弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的抗原,然后采用PBS进行冲洗;再采用封闭试剂封闭所述检测位点,得到椭偏显微成像蛋白芯片;其中,羧基改性表面的硅片的制备方法包括:首先采用去离子水冲洗硅片,然后采用氨基硅烷和浓硫酸的混合液浸泡冲洗后的硅片,再采用无水乙醇冲洗浸泡后的硅片,最后采用饱和琥珀酸钠无水乙醇溶液浸泡冲洗后硅片,获得羧基改性表面的硅片。

8.采用权利要求7所述的方法得到的椭偏显微成像蛋白芯片。

9.一种用于同时检测和/或鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的试剂盒,该试剂盒包含权利要求8所述的蛋白芯片。

10.下述应用,包括:

权利要求8所述的蛋白芯片在同时鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒中的应用;

权利要求8所述的蛋白芯片在是制备用于同时检测和/或鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的试剂盒的应用;

权利要求9所述的试剂盒在同时检测和/或鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒中的应用。