1.一种化学改性植物乳杆菌胞外多糖在制备清除DPPH药物中的应用;该应用中所述化学改性植物乳杆菌胞外多糖的浓度为1mg/mL或1.5mg/mL或2mg/mL;
其中,所述化学改性植物乳杆菌胞外多糖,是通过以下方法制备的:
1)取植物乳杆菌胞外多糖,以无水二甲基甲酰胺溶解;
2)15~45min后向其中加入三氧化硫吡啶复合物至终浓度为5~15mg/mL,反应2~4h;
3)利用截留分子量为8~14KDa的透析袋透析步骤2)所得产物,取透析袋内容物干燥;
其中,透析前先将步骤2)所得产物pH调至6.5~7.5再透析;
步骤2)中所述反应的温度为75~85℃,反应结束后冷却至20~30℃;
步骤1)中溶解于无水二甲基甲酰胺中的植物乳杆菌胞外多糖终浓度为3~7mg/mL;
步骤1)中所述植物乳杆菌胞外多糖是通过以下方法制备的:a)取保藏编号为CCTCC M 2014170的植物乳杆菌的发酵液,固液分离取上清;
b)向步骤a)所述上清液中加入乙醇,醇沉,固液分离取沉淀,以8~14KDa截留分子量的透析袋透析,取透析袋内容物干燥,即为粗多糖;
c)以含有40~60mM Tris-HCl、5~15mM MgSO4·7H2O的溶液作为粗多糖溶解液,溶解步骤b)所述粗多糖,而后加入核酸酶DNAse type-I至终浓度2~3μg/mL,水解;
d)而后加入蛋白酶Pronase E至终浓度40~60μg/mL,酶解;
e)而后加入三氯乙酸至终浓度10~15%w/v,20~40min后固液分离取上清,透析,取透析袋内容物即为所述植物乳杆菌胞外多糖;
步骤c)中粗多糖的终浓度为4~6mg/L。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于步骤b)中乙醇的加入量是所述上清液体积的1.5~2.5倍。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于步骤e)透析前,先调节上清液pH至4~5,再透析。