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专利号: 2016101660671
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种半胱氨酸检测方法,其特征在于包括如下步骤:

(1)将金核铂壳纳米粒子和吐温-20充分混合,然后将一系列不同浓度的标准半胱氨酸溶液与浓度为5-50mM、pH值为5.0-8.0磷酸盐缓冲溶液充分混合,室温下孵育10min以上,所述金核铂壳纳米粒子的粒径为22-40nm,其中金核的粒径为15-30nm,铂壳的厚度为3-5nm;

(2)取步骤(1)最终所获混合溶液,加入pH值为4.0-5.0的柠檬酸钠缓冲溶液和过氧化物酶模拟物的特征底物,均匀混合形成混合反应体系,所述混合反应体系中特征底物的浓度为0.1mM-10.0mM,反应5min以上,再分别测定各混合反应体系在可见光波段的吸光值,并获得半胱氨酸浓度-吸光值标准曲线,其中步骤(1)最终所获得的混合溶液中所含吐温-20的浓度为0.005%-0.05%,所述过氧化物酶模拟物的特征底物选自3,4-二羟基苯乙酸、四甲基联苯胺、邻苯二胺或2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐中的任意一种或两种以上的组合;

(3)将金核铂壳纳米粒子和吐温-20充分混合,然后和待测溶液及磷酸盐缓冲溶液混合、孵育后,再加入柠檬酸钠缓冲溶液和过氧化物酶模拟物的特征底物,均匀混合形成混合反应体系,所述混合反应体系中特征底物的浓度为0.1mM-10.0mM,测定该混合反应体系在可见光波段的吸光值,并与所述标准曲线对照,从而测得待测溶液中的半胱氨酸浓度。

2.如权利要求1所述的半胱氨酸检测方法中所用的半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于包括:

用作过氧化物酶模拟物的金核铂壳纳米粒子,所述金核铂壳纳米粒子的粒径为22-

40nm,其中金核的粒径为15-30nm,铂壳的厚度为3-5nm;

过氧化物酶模拟物的特征底物,

以及,辅助试剂,包含在以所述吐温-20、金核铂壳纳米粒子与半胱氨酸孵育时所用磷酸盐缓冲溶液和金核铂壳纳米粒子催化所述特征底物时所需的柠檬酸钠缓冲溶液,所述磷酸盐缓冲溶液的pH值为5.0-8.0,所述柠檬酸钠缓冲溶液的pH值为4.0-5.0。

3.根据权利要求2所述的半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:所述过氧化物酶模拟物的特征底物选自3,4-二羟基苯乙酸、四甲基联苯胺、邻苯二胺或2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐中的一种或两种以上的任意组合。