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专利号: 2016100877192
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种猪睾丸间质祖细胞的体外增殖培养基,其特征在于,所述培养基为含10-15%FBS,55μM β-巯基乙醇,1%ITS,1%L-谷氨酰胺,1%核苷酸,1000IU/mL LIF,10ng/mL EGF,

10ng/mL bFGF,20ng/mL PDGF-BB和含1%Penicilin-Stretomycin的DMEM培养基。

2.根据权利要求1所述的猪睾丸间质祖细胞的体外增殖培养基,其特征在于,所述培养基为含15%FBS,55μM β-巯基乙醇,1%ITS,1%L-谷氨酰胺,1%核苷酸,1000IU/mL LIF,

10ng/mL EGF,10ng/mL bFGF,20ng/mL PDGF-BB和含1%Penicilin-Stretomycin的DMEM培养基。

3.一种猪睾丸间质祖细胞的分化培养基,其特征在于,所述培养基为含10-15%FBS,55μM β-巯基乙醇,1%L-谷氨酰胺,500×胆固醇溶液,1ng/mL LH和含1%Penicilin-Stretomycin的DMEM培养基。

4.根据权利要求3所述的猪睾丸间质祖细胞的分化培养基,其特征在于,所述培养基为含15%FBS,55μM β-巯基乙醇,1%L-谷氨酰胺,500×胆固醇溶液,1ng/mL LH和含1%Penicilin-Stretomycin的DMEM培养基。

5.一种猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法,其特征在于,包括体外分离、检测和分化,包括以下步骤:(1)、利用权利要求1或2所述的猪睾丸间质祖细胞的体外增殖培养基培养仔猪睾丸成纤维细胞,每天半量换液,5~8天后,获得大量的克隆集落;

(2)、检测步骤(1)获得的克隆集落,证明其为猪睾丸间质祖细胞;

(3)、利用权利要求3或4所述的猪睾丸间质祖细胞的分化培养基培养睾丸间质祖细胞7天后,猪睾丸间质祖细胞分化为成熟睾丸间质细胞。

6.根据权利要求5所述的猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法,其特征在于,步骤(1)中培养7天。

7.根据权利要求5所述的猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法,其特征在于,步骤(3)中培养15天。

8.根据权利要求5所述的猪睾丸间质祖细胞的长期培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述检测包括功能蛋白检测、膜表面蛋白分析、和多潜能性分析。