1.一种磷光铱配合物,其特征在于,其化学式为:[Ir(CHO-btiq)2(bpy)][PF6],如式I所示。
2.根据权利要求1所述的一种磷光铱配合物的合成方法,其特征在于,其合成步骤如下:结构式如式II所示的配体由2-氯喹啉-3-甲醛与苯并噻吩-2-硼酸反应合成;
结构式如式III所示的配合物由式II的配体与三水合氯化铱反应合成;
结构式如式I所示的配合物由式III的配合物与1,10-邻菲罗啉反应,在反应体系中加入六氟磷酸钾经搅拌即得产物。
。
3.根据权利要求2所述的一种磷光铱配合物的合成方法,其特征在于,式II的化合物合成步骤如下:摩尔当量比1:1的2-氯喹啉-3-甲醛与苯并噻吩-2-硼酸,加入8%摩尔当量的四(三苯基膦)钯和3摩尔当量的碳酸钾,在四氢呋喃和水的混合溶剂中反应24至48小时,反应温度为70℃。
4.根据权利要求2所述的一种磷光铱配合物的合成方法,其特征在于,式III的铱配合物合成步骤如下:
1.5-2mmol的式II配体与0.75-1mmol三水合氯化铱在乙二醇乙醚和水的混合溶剂中加热反应得到。
5.根据权利要求2所述的一种磷光铱配合物的合成方法,其特征在于,式I的配合物合成步骤如下:a)式II所示的配合物与1,10-邻菲罗啉的摩尔质量比为1:2,反应温度为50-70℃,反应时间为5-10小时;
b)在反应体系中加入5-10摩尔当量的六氟磷酸钾,搅拌2-4小时。
6.根据权利要求1所述的一种磷光铱配合物的应用,其特征在于,该铱配合物具有醛基,醛基可以和半胱氨酸和高半胱氨酸发生环化反应,生成四氢噻唑或巯基吗啉环,会引起铱配合物的荧光信号变化,从而达到检测半胱氨酸和高半胱氨酸的目的。
7.根据权利要求6所述的一种磷光铱配合物的应用,其特征在于,a)用体积比V/V=4:1的乙腈和水的混合溶剂将该磷光铱配合物配制成10-50μM的稀溶液;
b)配制浓度为1-2mmol的半胱氨酸或高半胱氨酸水溶液;
c)在铱配合物的稀溶液中加入0-40摩尔当量的半胱氨酸、高半胱氨酸水溶液,37℃反应3至5小时;
d)用荧光分光光度计检测溶液的荧光变化。
8.根据权利要求6所述的一种磷光铱配合物的应用,其特征在于,对于其他常见的氨基酸没有响应,检测步骤如下:a)用体积比V/V=4:1的乙腈和水的混合溶剂将该磷光铱配合物配制成10-50μM的稀溶液;
b)配制浓度为1-2mmol的常见的氨基酸水溶液,包括甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、谷胱甘肽、甲硫氨酸、精氨酸、酪氨酸、丙氨酸、赖氨酸、亮氨酸、脯氨酸、色氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸;
c)在铱配合物的稀溶液中加入相同当量的上述常见氨基酸水溶液,37℃反应3至5小时;
d)用荧光分光光度计检测溶液的荧光变化。
9.根据权利要求1所述的一种磷光铱配合物的应用方法,其特征在于,半胱氨酸和高半胱氨酸的细胞荧光检测成像步骤如下:a)将5μM的铱配合物PBS溶液加入到细胞培养液中,在37℃下孵化30min,用激光共聚焦荧光显微镜进行细胞荧光成像,收集荧光通道分别为650±10nm和680±10nm;
b)分别往上述含铱配合物培养液中加入50μM Cys和Hcy,在37℃下孵化3小时,用激光共聚焦荧光显微镜进行细胞荧光成像,收集荧光通道分别为650±10nm和680±10nm。
10.根据权利要求1所述的一种磷光铱配合物的应用方法,其特征在于,高半胱氨酸的活体荧光检测成像步骤如下:将100μL的10μM铱配合物生理盐水溶液通过皮下注射到裸鼠的腹部,同时注射
100μL的100μM Hcy生理盐水溶液;采用515nm激光器进行激发,收集的荧光范围为大于
630nm的发射信号。