1.稠李多糖型禽畜饲料添加剂,其特征在于,按重量百分比组成如下:
所述的稠李多糖的制备方法如下:
1)超声浸提:料液比按质量比1:10-1:50,将稠李冻干粉溶于水中,控制温度为50-90℃,pH值5.0-9.0,超声波功率为100W-500W,超声时间为10min-50min,离心,取提取液继续进行微波提取;
2)微波辅助提取:取提取液,微波功率300W-500W,微波时间为20min-60min,离心,取提取液继续进行复合酶酶解;
3)复合酶酶解提取:取提取液,复合酶加入量为提取液重量的1.0%-5.0%,控制温度为30-60℃,pH 3.0-6.0,酶解时间为30min-60min;抽滤,滤液旋转蒸发浓缩,加入4倍体积的95%乙醇沉淀多糖,离心,去除上清液,冷冻干燥,得稠李粗多糖;
4)将冷冻干燥的稠李粗多糖加入适量蒸馏水重新溶解,Sephadex G-200层析进行分离纯化,用蒸馏水洗脱,流速为1ml/min,每2ml收集一试管,用硫酸-蒽酮法跟踪检测至无糖,收集含量最多的多糖组分在蒸馏水中透析24h,冷冻干燥,备用;用DEAE-32进一步纯化,磷酸盐缓冲液-水作为流动相,梯度模式进行洗脱,流速为0.8ml/min,每2ml收集一试管,用硫酸-蒽酮法跟踪检测至无糖,收集含量最多的多糖组分,即为纯化的稠李多糖;
所述的高粱米多肽的制备方法如下:
1)将高粱米粉碎,按料液比为1:15,在pH为10的氢氧化钠溶液中浸泡3h,提取温度为50℃,5000r/min离心20min,取上清液,用90%硫酸铵进行沉淀,再次离心,分离得到沉淀,进行冷冻干燥得到高粱米蛋白;
2)将高粱米蛋白配成8%的水溶液,pH调节为6.5,酶活添加量为6000u/g料,温度为60℃,提取时间为3h,然后沸水浴10min灭酶,3500r/min离心15min,取上清,纯净水透析、采用截留分子量为l0kDa超滤板超滤后进行冷冻干燥,得到高粱米多肽粉末;所述的酶为木瓜蛋白酶;
所述的板栗多肽的制备方法如下:
1)板栗去皮干燥后,用粉碎机粉碎,按料液比为1:10,加入pH 11的NaOH,提取温度为50℃,时间为3h,离心收集沉淀,冷冻干燥制备板栗蛋白;
2)复合酶分步水解:首先以复合风味蛋白酶进行水解,然后以碱性蛋白酶再进行水解制备板栗多肽,复合风味蛋白酶酶解条件为:pH6,酶活添加量为6000u/g料,时间1h,温度55℃,碱性蛋白酶酶解条件为:pH 8,酶活添加量为6000u/g料,时间3h,温度50℃;将酶解液加热到100℃,保持10分钟杀灭酶的活力;采用截留分子量为l0kDa超滤板超滤制备的酶解液,收集分子量为10kDa以下的酶解液;将酶解液用低温冷冻干燥机制得板栗多肽粉末。
2.按照权利要求1所述的稠李多糖型禽畜饲料添加剂,其特征在于:所述的复合酶是纤维素酶与果胶酶按质量比1:0.5~2的混合。
3.按照权利要求1所述的稠李多糖型禽畜饲料添加剂,其特征在于:所述的稠李花色苷的制备方法如下:
1)复合酶酶解提取:料液比按质量比1:10-1:50,将稠李冻干粉溶于水,复合酶加入量为料液重量的1.0%-5.0%,进行热水浸提,控制温度为30-70℃,pH范围值3.0-6.0,酶解时间为30min-60min,离心,过滤,提取液备用,沉淀物继续进行微波提取;
2)微波辅助提取:料液比按质量比1:10-1:15,将沉淀物溶于水中,微波功率300W-
500W,微波时间为20min-60min,离心,过滤,提取液备用,沉淀物继续进行超声浸提;
3)超声浸提:料液比按质量比1:10-1:15,将沉淀物溶于乙醇中,超声波功率为100W-
500W,超声时间为10min-50min,pH值为2-6,抽滤,提取液备用;
4)合并复合酶酶解的提取液、微波辅助的提取液和超声浸提的提取液,旋转蒸发浓缩,冷冻干燥后得到粗稠李花色苷干粉;
5)大孔树脂静态纯化:将粗稠李花色苷干粉配成8mg/ml的溶液,静态吸附条件是:温度
20℃,树脂的添加量为0.16g/ml;解析条件是:解吸剂70%乙醇,pH值为3,温度为60℃,得稠李花色苷干粉。
4.按照权利要求3所述的稠李多糖型禽畜饲料添加剂,其特征在于:所述的复合酶是纤维素酶与果胶酶按质量比1:0.5~2的混合。