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专利号: 2014105482195
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-10-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测甲砜霉素、氯霉素及氟苯尼考的三合一胶体金免疫层析试纸条的应用,其特征在于其对甲砜霉素、氟苯尼考及氯霉素的最低检测限分别是1ng/mL,2.5ng/mL,1ng/mL;

所述检测甲砜霉素、氯霉素及氟苯尼考的三合一胶体金免疫层析试纸条为聚氯乙烯PVC背衬(1),聚氯乙烯PVC背衬(1)前端设置样品垫(2),样品垫(2)通过结合垫(3)与硝酸纤维素膜(4)前端连接,硝酸纤维素膜(4)后端与吸水垫(5)连接;

所述结合垫(3)上含有胶体金标记的单克隆抗体;硝酸纤维素膜(4)上包被有氯霉素琥珀酸钠-BSA检测线T线(6)和羊抗鼠IgG控制线C线(7);

氯霉素琥珀酸钠-BSA是用于检测甲砜霉素、氯霉素及氟苯尼考的抗原,检测线与质控线平行;

所述胶体金标记的单克隆抗体为:以甲砜霉素的类似物即1-(4-氨基苯基)-2-二氯乙胺-1,3-丙二醇TAP-NH2作为半抗原,采用重氮化法将其与牛血清蛋白BSA偶联得到免疫原,混合弗氏佐剂免疫BALB/c小鼠;取合格的免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞sp/20融合,经过三次亚克隆和间接竞争ELISA的筛选得到能稳定分泌可同时识别甲砜霉素、氯霉素及氟苯尼考的单克隆抗体的细胞株,将其进行扩大培养后,注射到小鼠体内诱发产生腹水;采用辛酸-饱和硫酸铵法纯化腹水即得到单克隆抗体。