1.一种几丁质酶A在生物催化胶体几丁质生成N-乙酰-D-氨基葡萄糖中的应用,所述几丁质酶A的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于所述的应用为:将含几丁质酶A重组工程菌经诱导培养后的湿菌体用pH8.0磷酸盐缓冲液悬浮,超声破碎后,过滤,取滤液作为催化剂,以胶体几丁质溶液为底物,于pH值为4.6的醋酸缓冲液中,37℃下反应,反应结束后,将反应液离心,获得含N-乙酰-D-氨基葡萄糖的混合液;
所述胶体几丁质溶液按如下方法制备:将几丁质粉末加入丙酮中研磨至糊状,在10℃下边研磨边慢慢加入浓盐酸,用滤纸过滤,然后将滤液缓缓加入到剧烈搅拌的体积浓度
50%乙醇水溶液中,析出沉淀,离心去上清液,收集胶态几丁质,用蒸馏水a冲洗数次至中性,混于蒸馏水b即为胶体几丁质溶液;所述浓盐酸的体积用量以几丁质粉末质量计为
40mL/g,所述蒸馏水b的体积用量以几丁质粉末质量计为100mL/g。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述底物的体积用量以几丁质粉质量计,终浓度为3.33mg/L;所述催化剂的用量以超声破碎前湿菌体的质量计,终浓度为8.3g/L。
4.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述催化剂按如下方法制备:将含几丁质酶A的重组工程菌接种于含终浓度50μg/ml的Kan抗性的LB液体培养基中,37℃、250r/min培养过夜,取培养物,以体积浓度2%的接种量转接于含有终浓度50μg/ml Kan抗性的LB液体培养基中,37℃、250r/min培养至菌体浓度OD600为0.6~0.8,向培养物中加入终浓度
0.05mmol/L的IPTG诱导培养8h,收集湿菌体,将湿菌体在功率40%、破1s停1s条件下超声破碎,离心,取上清液即为催化剂。