1.一种恩诺沙星人工半抗原,其特征在于是以恩诺沙星与氨基丁酸在NHS、DDC和DMF存在条件下反应制备得到,所述半抗原含4个碳原子手臂,具有式(II)所示分子结构:其中,n为-CH2基团数目,n=3;
所述恩诺沙星人工半抗原的制备方法,包括以下步骤:
(1)按投料摩尔比为1∶1∶1将恩诺沙星、N-羟基琥珀酰亚胺和脂溶性碳二亚胺置于反应容器中,并将上述混合物用少量的DMF溶解,室温下避光搅拌过夜;
(2)将经步骤(1)得到的反应物离心取上清得A液;
取与恩诺沙星等摩尔量的氨基丁酸溶于少量蒸馏水中,得B液;
(3)将B液缓慢加到A液中,室温搅拌过夜,离心取上清液,调上清液为碱性,将析出的沉淀过滤,收集上清液;
(4)将步骤(3)制得的上清液调至酸性,收集沉淀,得到恩诺沙星半抗原。
2.根据权利要求1所述的恩诺沙星人工半抗原,其特征在于制备方法的步骤(3)所述调上清液为碱性是将上清液pH值调节为8.0~8.5;步骤(4)所述调上清液为酸性是将上清液pH值调节为5.0~6.0。
3.一种恩诺沙星人工抗原,其特征在于是将权利要求1所述恩诺沙星半抗原与蛋白质OVA偶联制备得到;具有式(III)所示分子结构:其中,n为-CH2基团数目,n=3;
所述恩诺沙星人工抗原的制备方法包括以下步骤:
(1)将等摩尔所述的恩诺沙星半抗原、DDC、NHS溶解于DMF中,室温避光反应过夜;
(2)将步骤(1)所得反应物离心取上清液,将上清液加入到含有载体蛋白的硼酸缓冲液中,混合物反应过夜;
(3)待步骤(2)反应完成后,将反应后混合液装入透析袋,透析得到所述人工抗原。
4.根据权利要求3所述的恩诺沙星人工抗原,其特征在于所述制备方法的步骤(2)所述载体蛋白为OVA,载体蛋白的浓度在20~30mg/mL;所述反应温度为4℃。
5.根据权利要求3所述的恩诺沙星人工抗原,其特征在于所述制备方法的步骤(3)所述透析采用0.9%的生理盐水透析3天,每天更换透析液3~5次。
6.一种权利要求3所述抗原的应用,其特征在于应用于制备恩诺沙星抗体或应用于恩诺沙星免疫检测方面。