1.一种恩诺沙星人工半抗原,其特征在于是以恩诺沙星与氨基丁酸或氨基己酸在NHS、DDC和DMF存在条件下反应制备得到,所述半抗原含4个或6个碳原子手臂,具有式(II)所示分子结构:其中,n为-CH2基团数目,n=4或6。
2.根据权利要求1所述恩诺沙星人工半抗原,其特征在于n=4。
3.一种权利要求1或2所述恩诺沙星人工半抗原的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)按投料摩尔比为1∶1∶1将恩诺沙星、N-羟基琥珀酰亚胺和脂溶性碳二亚胺置于反应容器中,并将上述混合物用少量的DMF溶解,室温下避光搅拌过夜;
(2)将经步骤(1)得到的反应物离心取上清得A液;
取与恩诺沙星等摩尔量的氨基丁酸或氨基己酸溶于少量蒸馏水中,得B液;
(3)将B液缓慢加到A液中,室温搅拌过夜,离心取上清液,调上清液为碱性,将析出的沉淀过滤,收集上清液;
(4)将步骤(3)制得的上清液调至酸性,收集沉淀,得到恩诺沙星半抗原。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于步骤(3)所述调上清液为碱性是将上清液pH值调节为8.0~8.5;步骤(4)所述调上清液为酸性是将上清液pH值调节为5.0~
6.0;
5.一种恩诺沙星人工抗原,其特征在于是将权利要求1或2所述恩诺沙星半抗原与蛋白质偶联制备得到;具有式(III)所示分子结构:其中,n为-CH2基团数目,n=4或6;优选n=4。
6.一种权利要求4所述恩诺沙星人工抗原的制备方法,其特征在于是采用活泼脂法将所述恩诺沙星半抗原与蛋白质偶联。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于包括以下步骤:(1)将等摩尔所述的恩诺沙星半抗原、DDC、NHS溶解于DMF中,室温避光反应过夜;
(2)将步骤(1)所得反应物离心取上清液,将上清液加入到含有载体蛋白的硼酸缓冲液中,混合物反应过夜;
(3)待步骤(2)反应完成后,将反应后混合液装入透析袋,透析得到所述人工抗原。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于步骤(2)所述载体蛋白为BSA或OVA,载体蛋白的浓度在20~30mg/mL;所述反应温度为4℃。
9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于步骤(3)所述透析采用0.9%的生理盐水透析3天,每天更换透析液3~5次。
10.一种权利要求5所述抗原的应用,其特征在于应用于制备恩诺沙星抗体或环丙沙星免疫检测方面。