1.一种从木豆枝叶中提取纯化牡荆苷和异牡荆苷的方法,其主要特征在于:木 豆新鲜或干燥枝叶经70~80%乙醇匀浆萃取、超声波辅助提取3次,提取液 浓缩后加入50~60℃温水,超声波振荡絮凝、静止,所得到上清液经乙酸乙 酯负压空化混悬液液萃取法、大孔吸附树脂富集法和一次ODS-C18反相中压 硅胶柱层析后得到牡荆苷和异牡荆苷产品,经过低温析晶和重结晶得到纯度 大于90%的纯品。
2.按照权利要求1所述的木豆枝叶,其特征在于:木豆枝叶主要来源于各品种 木豆植株的新鲜或者干燥枝叶。
3.按照权利要求1所述的匀浆萃取技术,其特征在于:匀浆萃取所用的溶剂为 70~80%乙醇,体积为固体质量的4~8倍,连续萃取3次,每次0.5~1.5min。 采用70~80%乙醇匀浆时,打破细胞壁的屏障作用,加快了胞内物质向溶剂 中的释放。
4.按照权利要求1所述的超声波辅助提取技术,其特征在于:所用提取温度为 35~50℃,所用的溶剂体积为固体质量的8~10倍,提取时间为30~45min。
5.按照权利要求1所述的超声振荡絮凝技术,其特征在于:提取物浓缩物中加 入50~60℃温水的体积为浓缩物的4~6倍,超声波振荡时间为15~25min, 频率为50~60KHz,静止时间为10~15min。超声波的震荡作用使得粘稠絮 凝物中包含的目标物质逐渐溶出。
6.按照权利要求1所述的负压空化混悬液液萃取法,其特征在于:所用溶剂除 乙酸乙酯外还包括乙酸甲酯、三氯甲烷、二氯甲烷,萃取所用的溶剂量为体 系的1/2,萃取次数为3~5次,所用压力为0.04~0.06MPa。回收有机溶剂 后所得固形物为目标物。该方法是以负压为动力,利用气泡产生的空化效应、 湍流效应的一种强化液液萃取工艺。
7.按照权利要求1所述的大孔吸附树脂富集法,其特征在于:所用树脂包括 D101、AB-8、AL-9及NKA系列大孔吸附树脂,该方法中大孔树脂吸附步骤 采用湿法装柱,保留液面,将负压空化混悬液液萃取所得到的固形物用水配 制成料液浓度为10~25mg/mL混悬药液,上样量1~2.5BV,以流速为每小 时6~8mL/g树脂、PH=7条件下过吸附柱。吸附后用水2BV洗杂质,然后 用60~70%乙醇6~9BV解吸,收集解吸液,浓缩膏,将浸膏按照质量- 体积1∶1(mg∶mL)加入甲醇-乙酸乙酯(体积比1∶1)50℃加热溶解,待 冷却至室温得到黄色析出物,干燥后即得目标化合物粗品。
8.按照权利要求1所述的ODS-C18反相中压硅胶柱层析技术,其特征在于:所 用样品为树脂富集后得到的目标化合物粗品。将该粗品用2~8%甲醇溶解, 配制成料液浓度为5~10mg/mL的样品液,上样量2~5BV,0.45μm过滤 后注入床体积为50~150mL的ODS-C18反相中压硅胶柱,用水-甲醇、水-乙 醇、水-丙酮或水-乙腈系统梯度洗脱(每个梯度2~6BV),收集洗脱液,每 份1/4~1/2床体积。用聚酰胺薄膜层析检测洗脱液成分,合并相同部分,展 开剂为三氯甲烷∶甲醇=15∶1~1∶1,显色剂为2%AlCl3乙醇溶液,紫外波 长为254nm和360nm。
9.按照权利要求1所述的低温析晶和重结晶技术,其特征在于:重结晶所用的 溶剂除三氯甲烷和甲醇外,还包括二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙腈和乙醇, 比例为三氯甲烷(或二氯甲烷、乙酸乙酯)∶甲醇(或丙酮、乙腈、乙醇)=15∶ 1~1∶1低温析晶温度为-10℃~20℃。