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专利号: 200610036447X
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1、一种检测克伦特罗的酶联免疫试剂盒,包括盒体、酶标板,其特征在于 还包括辣根过氧化物酶标记抗体、克伦特罗标准溶液、底物液、底物缓冲液和反 应终止液;所述酶标板孔内包被有能与抗克伦特罗抗体特异结合的包被抗原。

2、根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述酶标板是96/40 孔酶标板。

3、根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述酶标板是聚 苯乙烯微孔板,包被有能与抗克伦特罗抗体特异结合的包被抗原,并封闭微孔表 面未吸附位点。

4、根据权利要求1所述酶联免疫分析试剂盒,其特征在于,所述辣根过氧 化物酶标记抗体为抗克伦特罗多克隆抗体、单克隆抗体或基因工程抗体。

5、根据权利要求1所述的酶联免疫试剂盒,其特征在于,所述底物液为含 有过氧化氢或过氧化脲的pH5.0磷酸-柠檬酸缓冲溶液;所述底物缓冲液为含有 3,3,5,5四甲基联苯胺或邻苯二胺的pH5.0磷酸-柠檬酸缓冲溶液;所述终止液为 1mol/L硫酸溶液。

6、利用权利要求1所述酶联免疫试剂盒检测克伦特罗的方法,其特征在于 包括如下步骤:(1)做标准和样品两个平行检测,在标准品孔加入标准品,样品孔加入待测 样品,然后每孔加入酶标记物,轻拍混匀,室温孵育;

(2)倒出酶标板孔内中的液体,并清洗干净;

(3)每孔加入底物缓冲液与底物液的等体积混合液,轻拍混匀,暗处室温孵 育;

(4)加入反应终止液到孔中,混合均匀,在波长450或492nm下,以空气为 空白,测定各孔吸光值,在加入终止液后60min内读取吸光值;

(5)以所获样品吸光值的平均值计算抑制率,以抑制率为纵坐标,克伦特罗 浓度的半对数为横坐标绘制标准曲线,求出直线方程,根据方程式求出对应样品 的克伦特罗浓度;所述抑制率的计算式为:

其中,Amax为不加克伦特罗时的吸光值,Ax为克伦特罗浓度为x时的吸 光值,Amin为空白对照孔的吸光值。

7、一种检测前动物组织的制样方法,其特征在于包括如下步骤:将动物组 织捣碎,加0~10倍的水,调pH为5~7,在50~105℃下热浴0.1~15min,然 后离心或过滤,离心上清液或滤液为提取液。

8、根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述热浴为水浴、油浴或蒸 汽浴。